大家經(jīng)常會(huì)討論移液的問(wèn)題，這個(gè)步驟在ELISA實(shí)驗(yàn)中的卻是比較重要的。在加樣品和加顯色液的時(shí)候是定量的，產(chǎn)生氣泡可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響蠻大的。總之，掌握微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點(diǎn)是可以幫助您在實(shí)驗(yàn)中避免不必要的麻煩。
1.加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。
2.試劑的加入在國(guó)產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加，除了要注意滴加的角度外，滴加的速度也很重要，滴加太快，很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象，這樣就會(huì)在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附，從而引起非特異顯色。所以，有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性，下次測(cè)定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致.
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